Resina de purificacióin por afinidad CLICK’N CUT

CLICK’N CUT™ es una herramienta universal y robusta para obtener proteínas sin etiqueta en un proceso de un solo paso basado en la afinidad por inteínas. Es adecuada para cada paso del desarrollo de productos y procesos: I+D, fabricación preclínica, clínica e industrial. Las inteínas son dominios proteicos que se autocierran y que pueden utilizarse en técnicas de purificación de proteínas para aislar selectivamente una proteína diana de interés. Una forma de hacerlo es utilizando una resina de afinidad de inteínas, que es un tipo de resina cromatográfica que se une específicamente a proteínas marcadas con inteínas. El uso de la resina de afinidad de inteínas es una técnica popular en la purificación de proteínas porque proporciona una alta selectividad, un alto rendimiento y una alta pureza de la proteína diana. A continuación se exponen algunos puntos clave a tener en cuenta cuando se trabaja con resina de afinidad de inteínas para la purificación de proteínas: 1.Elección de la inteína adecuada: La elección de la inteína depende de los requisitos específicos del experimento. CLICK’N CUT es una herramienta universal con total compatibilidad proteica, aplicable a cualquier condición experimental. 2.Construcción de la proteína marcada con inteína: La proteína diana de interés se fusiona con el dominio inteína mediante tecnología de ADN recombinante. La inteína puede colocarse en el extremo N o C de la proteína diana, en función de los requisitos específicos del experimento. Una vez expresada y purificada la proteína de fusión, la inteína puede utilizarse para aislar la proteína diana. 3.Purificación de la proteína marcada con inteína: La proteína de fusión purificada se aplica a la resina de afinidad de inteína, que se une específicamente al dominio de inteína. Tras el lavado para eliminar las proteínas unidas de forma no específica, la proteína diana se libera de la resina al desencadenarse la autolimpieza mediada por la inteína. La proteína diana liberada puede purificarse mediante pasos cromatográficos adicionales. 4. Optimización de las condiciones de purificación: Las condiciones de purificación, como el pH, la concentración de sal y la composición del tampón, pueden afectar a la unión y liberación de la proteína diana de la resina de afinidad por inteína. Por lo tanto, es importante optimizar estas condiciones para maximizar el rendimiento y la pureza de la proteína diana. En resumen, la resina de afinidad de inteínas es una potente herramienta para la purificación de proteínas que proporciona una alta selectividad, rendimiento y pureza. Eligiendo cuidadosamente la inteína adecuada, construyendo la proteína marcada con inteína, preparando la resina y optimizando las condiciones de purificación, los investigadores pueden obtener proteínas diana altamente puras y funcionales para aplicaciones posteriores.